lunes, 10 de septiembre de 2012

2.1. Medios de Cultivo

Los medios de cultivo constituyen un elemento fundamental para el cultivo “in vitro” de células, tejidos, protoplastos, anteras y para lograr el desarrollo de embriones, embrioides, la organogénesis, la micropropagación, etc. Los medios de cultivo tienen una serie de componentes generales y específicos cuya presencia y concentración estará en dependencia del objetivo que se persiga en su utilización. Así, los medios de cultivo pueden ser líquidos o tener un soporte sólido, tienen sustancias minerales, vitaminas, aminoácidos, azúcares, fitohormonas, etc.
También pueden contener por ejemplo extractos naturales, según su finalidad y debe quedar claro que no todos llevan un complemento completo de todos los factores.
En el cultivo in vitro de tejidos vegetales, se denomina solución madre o stock a cualquier solución de composición elevada y concentración definida, en la que el soluto puede ser uno o más compuestos químicos de los que conforman un determinado medio de cultivo y que mediante un proceso de dilución permita la preparación de 1 litro de medio de cultivo.

Desde el punto de vista práctico la preparación de soluciones madres o stock tiene como finalidad evitar: Pesar cada uno de los compuestos químicos que constituyen un medio de cultivo, cada vez que se requiera elaborar, lo que implicaría evitar demasiado tiempo en su preparación.

Inexactitud al pesar cantidades muy pequeñas de ciertos compuestos químicos.Otro aspecto importante que se debe considerar es la cantidad de agua que se utilice para disolver las sales inorgánicas que constituyen las soluciones stock y en general el medio de cultivo.

El agua debe ser destilada o bidestilada y necesariamente des ionizada.

Se han creados numeroso medios de cultivos (medio basal), cuyas diferencias estriban en las cantidades y tipos de sales empleadas. Entre los medios de cultivo más conocidos se encuentran:

Murashige y Skoog (MS) (1962), Linsmaier y Skoog (LS) (1965), Borgin y Nitsch (BN) (1967), Gamborg (B5) (1970), Sachs (1860), Knop (1865), Arnon y hoglan (1940),Gautheret (1942), Riquer y Duggar (1946), Heller (1953-58) Nitsch y Nitsch (1956),Torrey y Shigemura (1957-64),White (1963),Blaydes (1966),Miller y Oyima (1968).



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